CENTER FOR BRAIN SCIENCE

BMA

Support Unit for Bio-Material Analysis

セルソーティング/フローサイトメトリー解析

サービス概要

セルソーター（BD FACSAria™ II SORP）を用い、蛍光標識細胞の分取（多色対応）をはじめ、希少細胞の回収（低頻度集団）、生細胞ソーティング、固定細胞ソーティングなど、多様なニーズに対応したセルソーティングサービスを提供しています。
また、フローサイトメーターを用いた細胞解析にも対応しており、蛍光タンパク質発現細胞の割合解析、細胞周期解析や生細胞率評価などが可能です。

注意事項

遺伝子組換え体に関連する試料については、安全管理基準に基づき受託可否を判断いたします。

詳細は事前にお問い合わせください。

ソーティング内容

• 最大4種類の細胞集団を分取
• 蛍光タンパク質などのマーカー遺伝子を導入した細胞を選択的に分取
• シングルセル（単一細胞）のソーティングに対応し、各種マルチウェルプレート（6 - 384ウェル）への直接分注
• インデックスソーティング（Index Sorting）にも対応しており、各ウェルに分注された細胞の蛍光強度や散乱光情報を記録することで、後解析との紐付けが可能

解析内容

• 蛍光タンパク質発現細胞の割合解析（GFP / RFP / YFP など）
• 細胞周期解析（DNA含量測定によるG0/G1、S、G2/M期の評価）
• 生細胞率（viability）評価
• 蛍光強度分布解析（発現量のばらつき評価）

使用装置

• BD FACSAria™ II SORP（BD Biosciences、Index Sorting対応）
  搭載レーザー：Violet（405 nm）、Blue（488 nm）、Green（535 nm）、Red（640 nm）
• BD FACSAria™ SORP（BD Biosciences、Index Sorting対応）
  搭載レーザー：UV（355 nm）、Violet（405 nm）、Blue（488 nm）、Yellow-Green（561 nm）、Red（640 nm）
• FACSymphony™ A3（BD Biosciences）
  搭載レーザー：UV（355 nm）、Violet（405 nm）、Blue（488 nm）、Yellow-Green（561 nm）、Red（637 nm）

BD FACSAria™ II SORP / BD FACSAria™ SORP

FACSymphony™ A3

ソーティング例

 

HEK293T細胞にPEI-Maxを用いてpAAV-CMV-EGFP（Addgene plasmid #105530）を導入し、その後、EGFP蛍光強度に基づいてセルソーティングを行った。

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